Pregnenolon, diğer steroid hormonlarının (örneğin, progesteron, kortizol, testosteron, östrojen) sentezinde bir ara ürün olarak görev yapar. Pregnenolon seviyeleri, bu diğer hormonların düzgün sentezlenmesi için önemlidir. Bu nedenle, pregnenolon testi, hormon profilini değerlendirmek ve potansiyel hormonal dengesizlikleri belirlemek için kullanılabilir.